EB病毒衣壳抗原IgG抗体检测试剂盒（电化学发光法）(JSZ2300045)

受理号：JSZ2300045

体外诊断试剂产品注册技术审评报告

产品中文名称：EB 病毒衣壳抗原IgG 抗体检测试剂盒（电 化学发光法）

产品英文（原文）名称：Elecsys EBV VCA IgG 产品管理类别：第三类

申 请 人 名称：罗氏诊断公司 Roche Diagnostics GmbH

国家药品监督管理局  医疗器械技术审评中心

目  录

基本信息  3

一、申请人名称  3

二、申请人住所  3

三、生产地址  3

技术审评概述  3

一、产品概述  4

二、临床前研究概述 5

三、临床评价概述  9

四、产品受益风险判定  10

综合评价意见  12

基本信息

一、申请人名称

罗氏诊断公司 Roche Diagnostics GmbH

二、申请人住所

Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germany

三、生产地址

Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germany

技术审评概述

一、产品概述

（一）产品主要组成成分

本试剂盒包含以下组分:

M      包被链霉亲合素的微粒， 防腐剂。

R1      生物素化的 EBV-特异性抗原，MES  缓冲液， 防腐 剂。

R2      钌标记的 EBV-特异性抗原，MES 缓冲液，防腐剂。 Cal1   阴性定标液 1，缓冲液， 防腐剂。

Cal2   阳性定标液 2，缓冲液， 防腐剂。

（二）产品预期用途

本产品用于体外定性检测人血清和血浆中的 EB 病毒（EBV） 的 IgG 抗体（包括 VCA、EA 和 IEA 抗原的 IgG 抗体，但无法区  分）。

本产品用于辅助诊断传染性单核细胞增多症和判定 EBV 感 染阶段。

（三）产品包装规格

100 测试/盒、300 测试/盒。

（四）产品检验原理

夹心法原理。总检测时间：18 分钟。

第 1 次孵育：样本、生物素化的 EBV-特异性重组抗原、钌 复合物标记的 EBV-特异性重组抗原形成夹心复合物。

第 2 次孵育：加入包被链霉亲合素的微粒后，该复合物通 过生物素与链霉亲合素的相互作用与固相结合。

将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将微粒吸附在电极 表面。 除去未与微粒结合的物质。给电极加以一定的电压，使 复合物化学发光， 并通过光电倍增器测量发光强度。

仪器通过软件（比较由样本反应产物获得的电化学发光信 号值和先前定标获得的 cutoff 值） 自动计算检测结果。

二、临床前研究概述

（一）主要原材料

本产品的主要原材料包括：生物素化的 EBV-特异性抗原（包 括 IEA/EA/VCA），钌标记的 EBV-特异性抗原（包括 IEA/EA/VCA）， EBV VCA IgG 阳性人血清等。 由于 EBV 的免疫反应多样且抗原特 异性 IgG 应答具有很大的异质性，为了确保未产生 VCA IgG 抗 体的稀有患者样本也能被检测到， 申请人在选择原材料时，在 VCA 抗原的基础上，补充了早期抗原（EA）和即刻早期抗原（ IEA）， 作为补充检测。

这些主要原材料均为 自行制备。通过功能性试验，确定了

原材料的适用性，制定了各主要原材料的质量标准并经检验合 格。

（二）生产工艺及反应体系研究

申请人通过企业内部试验确定了最佳的生产工艺及反应体 系。 申请人对反应体系中样本量，R1，R2 和磁珠的体积等进行 优化，最终确定了最佳反应体系。

（三）分析性能评估

产品分析性能评估主要包括准确度，精密度，分析特异性， 最低检出限，钩状效应等研究。申请人提交了有效运行的质量 管理体系下生产的三批产品进行的性能评估资料。

1.准确度

采用申报产品与对比试剂 Abbott Architect EBV VCA IgG 进行比较研究，检测 1571 例样本。检测结果的阳性符合率、阴 性符合率和总体一致率均超过 90%。同时进行了 3 批批与批之间 以及不同机型间的方法学比对，验证多批次试剂间及机型间的 一致性。其中，批与批之间以及机型与机型间的阳性符合率和 阴性符合率均超过 98%，总体一致率超过 96%。

2.精密度

使用 3 批试剂盒在适用机型上对阴性血清样本，cut-off 值附近血清样本，阳性血清样本以及质控品进行了精密度研究，

评估了重复性， 中间精密度以及再现性。可接受标准分别为： 对于重复性，当 COI<1.0 时，SD ≤ 0.08 COI，当 COI ≥ 1.0 时，CV ≤ 8.0%；对于中间精密度，当 COI<1.0 时，SD ≤ 0.10 COI，当 COI ≥ 1.0 时，CV ≤ 10.0%； 对于再现性， 当 COI ≤ 1.0 时，SD ≤ 0.15 COI，当 COI > 1.0 时，CV ≤ 15 %。检 测结果均符合要求。

3.分析特异性

分析特异性包含交叉反应性研究， 干扰研究。

在交叉反应中，使用 申报试剂盒检测由商品化检测方法鉴 定为阳性的潜在的交叉反应性样本，包含单纯疱疹病毒 II 型， 水痘-带状疱疹病毒，乙型肝炎病毒，人疱疹病毒 6 型，肺炎支 原体，巨细胞病毒，单纯疱疹病毒 I 型，细小病毒 B19，弓形虫 病，风疹病毒，人类免疫缺陷病毒， 甲型肝炎病毒，戊型肝炎 病毒，ANA，SLE/dsDNA，大肠埃希菌等。如果申报试剂盒获得 有反应的检测结果，还进行了同类产品检测来评估一致性。

在干扰研究中，对各种干扰物质进行评价，具体为：胆红 素(≤ 66 mg/dL 或≤1130 μmol/L），血红蛋白(≤ 1000 mg/dL 或≤ 0.621 mmol/L），脂肪乳剂(≤ 2000 mg/dL），生物素( ≤ 4912 nmol/L 或≤ 1200 ng/mL），类风湿因子(≤ 1200 IU/mL），人 IgG (≤ 2.4 g/dL），人血清白蛋白( ≤ 7 g/dL），人 IgM (≤ 0.35

g/dL），人 IgA (≤ 0.60 g/dL），检测结果显示，在所列浓度范 围内的干扰物质对结果无影响。

评估以下 17 种常用药物对检测性能的影响，具体为：乙酰 半胱氨酸（ 150 mg/L），乙酰水杨酸（ 30 mg/L），氨苄西林钠（ 75 mg/L），抗坏血酸（ 52.5 mg/L），头孢西丁（ 750 mg/L），强力 霉素（ 18 mg/L），肝素（ 3300 IU/L），左旋多巴（ 7.5 mg/L）， 甲基多巴+1.5（ 22.5 mg/L），甲硝唑（ 123 mg/L），利福平（ 48 mg/L），对乙酰氨基酚（ 156 mg/L），环孢菌素（ 1.8 mg/L），布 洛芬（ 219 mg/L），茶碱（ 60 mg/L），苯丁酮（ 321 mg/L），伊 曲康唑（ 50 mg/L），检测结果显示，除了伊曲康唑外，未发现 对此检测的显著性干扰。伊曲康唑可导致 COI 值降低。

4.最低检出限

使用 3 批试剂盒在适用机型上进行 LoB 和 LoD 的研究。结 果均符合要求。

5.钩状效应

申请人对 4 个显示有 HOOK 效应可能性的样本进行进稀释， 检测是否有由于 HOOK 效应导致假阴性结果而产生风险。结果显 示未发现高剂量钩状效应引起的假阴性结果，但也不能完全排 除高剂量钩状效应的发生。

（四）阳性判断值研究

申请人使用申报试剂盒检测具有明确 EBV 感染状态的患者 样本，测试了不同的预设 cut-off 公式，对其结果进行灵敏度 和特异性分析，最终建立产品的 cut-off 公式。采用血清转换 盘进行灰区的建立。对 512 例样本进行了可比性研究，初步验 证了 cut-off 公式和灰区范围。最后进行了外部的临床试验研 究完成了 cut-off 公式的确认，验证和确认了试剂盒阳性判断 值的合理性。

（五）稳定性研究

申请人对本产品的实时稳定性、使用稳定性、运输稳定性 和样本稳定性进行了研究，确定了在各种条件下本产品及样本 的有效保存时间。

三、临床评价概述

申请人在首都医科大学附属北京儿童医院、上海交通大学 医学院附属瑞金医院、华中科技大学同济医学院附属同济医院、 上海市儿童医院和杭州市第一人民医院共五家机构完成了临床 试验。采用试验用体外诊断试剂与临床参考标准或已上市产品 进行比较研究试验，验证本产品的临床性能。入组样本包括： 疑似 EB 病毒感染患者的血液样本，共计 1621 例。

针对 EBV 感染阶段的确定，试验结果显示，试验体外诊断 试剂与临床参考标准比较的总体临床符合率为 94.3%(95%CI：

93.2%,95.4%)，对于三个 EBV 感染确定阶段的符合率均达到 90% 以上。

针对 EA IgG 和 VCA IgG 联合检测性能的验证，共纳入 381 例样本，其中阳性样本 227 例，阴性样本 154 例，试验结果显 示， 试验体外诊断试剂与对比试剂的阳性符合率为 98.7% （ 95%CI ： 96.2%,99.6% ）， 阴 性 符 合 率 为 88.3%（ 95%CI ： 82.3%,92.5%），总符合率为 94.5%（ 95%CI：91.7%,96.4%）。本 产品与对比方法检测不一致的样本，均结合第三方验证结果进 行了详细分析。

综上所述，临床试验结果满足技术审评要求。

四、产品受益风险判定

根据申请人提供的申报资料，经综合评价，在目前认知水 平上，认为本产品可为辅助诊断传染性单核细胞增多症和判定 EBV 感染阶段提供一种有效的方式，认为该产品的上市为适用人 群带来的受益大于风险，能够较大程度地满足医疗需求。但为 保证用械安全，基于对主要剩余风险的规避，需要在说明书中 提示以下信息：

1.无反应的 EBV VCA IgG 结果并不能完全排除 EBV 感染的 可能性。在急性感染早期，个体可能尚未产生可检出的 EBV IgG 抗体。

2. Elecsys EBV VCA IgG 检测是一种定性检测方法。其数 值结果并不表示 EBV 感染的特定阶段，因此不应与其他制造商 的 EBV IgG 检测的数值结果进行比较。

综合评价意见

依据《医疗器械监督管理条例》（ 国务院令第 739 号）、《体 外诊断试剂注册与备案管理办法》（国家市场监督管理总局令第 48 号）等相关医疗器械法规与配套规章，经对申请人提交的注 册申报资料进行系统评价， 申报产品符合安全性、有效性要求， 符合现有认知水平，建议准予注册。

2024 年 12 月 20  日

附件：产品说明书

【产品名称】

通用名称：EB病毒衣壳抗原IgG抗体检测试剂盒（电 化学发光法）

英文名称：Elecsys EBV VCA IgG

【包装规格】

100测试/盒

【预期用途】

本产品用于体外定性检测人血清和血浆中的 EB 病 毒（EBV）IgG 抗体（包括 VCA  、EA 和 IEA 抗原 的 IgG 抗体，但无法区分）。

本产品用于辅助诊断传染性单核细胞增多症和判定 EBV 感染阶段。

cobase 免疫测定分析仪的工作原理是电化学发光免 疫分析“ECLIA”。

概要

EB 病毒，也称为人疱疹病毒 4（HHV4），是 8 种已 知的人疱疹病毒中的一种，全球约 90 %的人群在年 轻时已经感染，且通常很少引起并发症。这些感染 大多数无症状或仅表现为轻微的非特异性症状。1   最常见的 EBV  相关疾病是症状性的急性原发性感 染，称为传染性单核细胞增多症（IM），主要感染 青少年和年轻成人。IM 的特征是包括发热、咽炎和 颈淋巴结肿大的三联征，通常是以支持疗法为主要 治疗措施的自限性疾病。2 然而，其早期和准确诊断 仍具有临床价值，因为 EBV 具有高度传染性，在极 少数情况下，一些并发症可能造成严重的健康风险。 1 在原发感染期间发生裂解复制后，EBV 终生潜伏， 主要存在于 B-细胞中。3  EBV 感染与多种自身免疫 性疾病以及几种不同的恶性疾病（包括淋巴瘤和癌 症）相关。4 免疫抑制可导致移植后淋巴组织增生性 疾病（PTLD），这是一种致死性的 B 细胞增殖失控 性疾病。5EBV 主要通过唾液传播，但也曾报告性传 播以及通过实体器官和造血干细胞移植的传播。6         各种病毒、细菌和寄生虫病均可引起单核细胞增多 症样症状，尤其是在早期感染期间。7 通常采用生物 标志物联合进行鉴别诊断，以排除其他有类似症状 的感染或状况，例如急性 HIV 或 CMV 感染或弓形 体病。EBV 血清学也可用于测定移植物供体和受体 的免疫状况，评估患者发生 PTLD 的风险，这种风 险可由既往 EBV  初次感染患者的重新激活或新发 EBV 感染引起。8,9,10,11

针对 EBV  的特异性血清学检查通常用于确诊急性 EBV 感染，因为其临床体征和症状的灵敏性或特异 性并非很高。2 通常联合使用 3 种不同的生物标志物 来确定 EBV 感染阶段：EBV 抗原的 IgM 抗体、EBV 病毒衣壳抗原（VCA）的 IgG 抗体和 EBV 核抗原-1 （EBNA-1）的 IgG  抗体。 12,13Anti-EBV  IgM  和 anti-EBV VCA IgG 抗体通常可在疾病临床发作时检 出。IgM 可保持阳性直到原发感染后 2 到 6 个月， 而 VCA IgG 抗体通常终身持续存在。EBNA-1  IgG 抗体通常在原发感染后 6-12 周内出现，且终生持续 存在。因此，存在 IgM  和 VCA  IgG  抗体，缺乏 EBNA-1 IgG 抗体并结合典型的临床表现，表明为急 性感染。而缺乏 IgM  抗体以及存在 VCA  IgG  和 EBNA IgG 抗体这表明既往感染和潜伏状态。12,13 对 于癌症、移植、HIV/AIDS  和自身免疫综合症中的 EBV 监测，则适用一些特定规则，具体情况因疾病 而异。12,14,15

【检验原理】

夹心法原理。总检测时间：18 分钟。 (cobas e 411/cobas e 601 ，cobas e 602)

l 第 1 次孵育：35μL/28μL 样本、生物素化的 EBV- 特异性重组抗原(55μL/44μL)、钌复合物 a)标记 的 EBV-特异性重组抗原(60μL/48μL)形成夹心  复合物。

l 第 2 次孵育：加入包被链霉亲合素的微粒

(50μL/40μL)后，该复合物通过生物素与链霉亲 合素的相互作用与固相结合。

l 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将微粒 吸附在电极表面。未与微粒结合的物质通过

ProCell/ ProCell M 除去。给电极加以一定的电 压，使复合物化学发光，并通过光电倍增器测 量发光强度。

l 仪器通过软件（比较由样本反应产物获得的电 化学发光信号值和先前定标获得的 cutoff 值） 自动计算检测结果。

a) Tris(2,2’-双吡啶)钌(II)-复合体 (Ru(bpy)  )

【主要组成成分】 试剂-工作溶液

试剂 rackpack（M，R1，R2）标记为 EBVVCAG 。 M    包被链霉亲合素的微粒（透明瓶盖），1 瓶，6.5  mL：包被链霉亲合素的微粒 0.72 mg/mL；防腐剂。

R1   生物素化的 EBV-抗原（灰色瓶盖），1 瓶，7 mL： 生物素化的 EBV-特异性抗原（重组体，大肠杆菌）>  1000 μg/L，MES b)缓冲液，50 mmol/L，pH 6.5；防 腐剂。

R2   钌标记的 EBV-抗原（黑色瓶盖），1 瓶，8 mL： 钌复合物标记的 EBV-特异性抗原（重组体，大肠杆 菌）> 1000 µg/L，MES 缓冲液，50 mmol/L，pH 6.5； 防腐剂。

b) MES =  吗啉乙烷磺酸

EBVVCAG Cal1       阴性定标液 1（白色瓶盖，冻干

品），1 瓶，每瓶 1.0 mL：人血 清，对 EBV VCA IgG 无反应； 缓冲液；防腐剂。

EBVVCAG Cal2       阳性定标液 2（黑色瓶盖，冻干

品），1 瓶，每瓶 1.0 mL：人血 清，对 EBV VCA IgG 有反应； 缓冲液；防腐剂。

提供的物品

参阅“试剂-工作溶液”一节。

      2 ×4 试剂瓶用标签

      2 个贴有标签的压盖式小空瓶

需要的物品（未提供）

●         REF 08355428190，PreciControl EBV

IgM/VCA IgG，注册证号：国械注进20243400376， 6 ×2.0 mL   

●         REF 11776576322 ，CalSet Vials ，2 × 56只压 盖式小空瓶

●         通用实验室设备

●         cobase 分析仪

●         蒸馏水或去离子水

cobase 411  分析仪所需辅助材料：

●         REF 11662988122，三丙胺缓冲液ProCell， 国械备20150369，6 × 380 mL系统洗液

●         REF 11662970122，缓冲液CleanCell ，国械 备20150053，6 × 380 mL测量池清洗液

●         REF 11930346122，清洗液Elecsys SysWash， 国械备20151113 ，1 × 500 mL附加洗液

●         REF 11933159001，测量池清洗液适配器 Adapter for SysClean

●         REF 11706802001，分析杯AssayCup，60 × 60 个反应杯  

●         REF 11706799001，分析吸头AssayTip，

30 × 120个吸头

●         REF 11800507001,  垃圾盒Clean-Liner    cobase 601  和 cobase 602 分析仪的辅助材料：

●         REF 04880340190，三丙胺缓冲液ProCell M， 国械备20150369，2 ×2 L系统溶液

●         REF 04880293190，缓冲液CleanCell M ，国 械备20150053 ，2 ×2 L测量池清洗液

●        REF 03023141001，PC/CC杯PC/CC-Cups， 12个，用于在使用前预热三丙胺缓冲液ProCell M和 缓冲液CleanCell M

●         REF 03005712190，试剂针清洗液ProbeWash M ，国械备20151640号，12 × 70 mL清洗液，用于运 行终止和试剂更换期间冲洗试剂针。

●         REF 12102137001，分析吸头/分析杯

AssayTip/AssayCup ，48盘 × 84分析杯或分析吸头， 废物袋     

●         REF 03023150001，废物盒WasteLiner，废物 袋        

●         REF 03027651001，测量池清洗液适配器 SysClean Adapter M

所有分析仪的其他材料：

REF 11298500316，清洗液ISE Cleaning

Solution/Elecsys SysClean ，国械备20151638号，5 ×

100 mL系统清洗液

【储存条件及有效期】

2～8℃保存，有效期 12 个月。  生产日期和失效日期：见标签。

避免冷冻。

请垂直摆放 Elecsys 试剂盒，以确保使用前自动混合 过程中微粒充分混匀。

复溶的定标液应直立放置以免定标液吸附在瓶盖 上。

【适用仪器】

【样本要求】

样本采集和制备

只有以下类型的样本可用于检测：

血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。 肝素锂、EDTA-K2和EDTA-K3血浆。

可以使用含有分离胶的血浆管。

判断标准：阴性样本绝对偏差±0.25个血清值的COI 值（cutoff index）；有反应性样本：回收率在血清值 的75-125 %范围内。

20～25 °C稳定保存5天，2～8 °C稳定保存14天，

-20 °C (±5 °C)稳定保存3个月。这些样本可冻融3次。 选择合适的试管或系统进行不同类型样本的采集，  不是所有的试管都可用于检测。不同厂商的样本采  集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检  测结果。如果采用原始试管（样本采集系统）处理  样本，请参照试管/采集系统生产商提供的说明。

样本不能添加添加剂（灭菌剂，抗氧化剂或可能改 变样本pH或离子强度的物质）， 以避免检测结果错 误。

混合样本和其它人造材料对不同的检测方法可能产 生不同的影响，因而可能造成结果差异。

有沉淀的样本和解冻的样本检测前必须先作离心处 理。

切勿使用加热灭活的样本。

检测前，请确保样本、定标液及质控品平衡至20~ 25 °C。

考虑到可能存在的挥发效应，上机的样本、定标液 和质控品应在2小时内分析/测定。

尚未确定Elecsys EBV VCA IgG检测采用尸源样本 或除血清和血浆以外的体液样本的性能。

【检验方法】 试剂处理

试剂盒内的试剂（M 、R1 、R2）为即用型试剂，采 用与系统兼容的试剂瓶提供。

定标液：

准确添加1.0 mL蒸馏水或去离子水小心溶解瓶内物 质，垂直加盖静置15分钟待其复溶。小心混匀，避 免产生泡沫。

将复溶的定标液分装到所提供的带有标签的压盖式 小空瓶内

cobase 411分析仪：20～25 °C下定标过程中，复溶 的定标液只可放置在分析仪上。每次吸样完毕后， 立即将定标液盖紧直立置2～8 °C保存。

考虑到可能存在的挥发效应，每瓶定标液最多使用3 次。

cobase 601和cobase 602分析仪：除非在分析仪上需 要使用整瓶定标液进行定标，否则应将新鲜的复溶 定标液分装于压盖式小空瓶内（CalSet Vials）。将 提供的标签贴在这些小瓶上。将这些分装定标液保 存在2～8 °C  或 -20 °C (±5 °C)下备用。

分装的定标液只限一次定标使用。

正确操作需要的所有信息通过相应的试剂条形码读 取。

请注意：两个小瓶标签，以及其它标签（如果提供） 均包含有2个不同的条形码。黄色标志的条形码仅用  于cobas 8000系统。如果使用cobas 8000系统，请将  瓶盖转动180°到正确位置，使得系统能够读出条形  码。像往常一样将小瓶放在仪器上。

测定

要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的 相关指导。并参考分析仪的相应操作手册-具体测定 说明。

使用前分析仪自动对微粒进行再混匀。通过试剂条 形码读取测试具体参数。在特殊情况下，分析仪无 法自动读取条形码信息时，请输入条形码标签上的 15位数字序列。

将冷藏试剂平衡至大约20 °C左右，并放置在分析仪 的试剂盘（20 °C）内。避免产生泡沫。分析仪能自 动调节试剂温度和开、关各试剂盒瓶盖。

定标液：

将复溶的定标液放入到样本区内。

所有必需的定标相关信息都可通过条形码阅读自动 获取。

定标完成后，将定标液保存于2～8 °C或弃去（cobas e 601和cobase 602分析仪）。

定标

EBVVCA IgG 尚无国际标准品。

定标频率：新批号试剂必须使用 EBVVCAG Cal1 、 EBVVCAG Cal2 和新鲜试剂进行定标（新试剂盒在 分析仪上放置不能超过 24 小时）。

根据可接受的实验室定标验证，可以延长定标周期。 以下情况建议重新进行定标：

l 使用同一批号试剂 8 周后

l 在分析仪上使用同一试剂盒 7 天后

l 根据需要：如失控

质量控制

质控采用 PreciControl EBV IgM/VCA IgG。

各浓度质控至少每 24 小时内检测一次，每次更换试 剂盒或定标后也须进行质控。

各实验室可根据各自的情况设定合适的质控限和质 控周期。质控测定值必须处于规定的质控限内。若 失控每个实验室必须采取相应的纠正措施。

如果需要应重复检测有关样本。

质控应遵循适用的政府法规和当地指南。

计算

分析仪通过EBVVCAG Cal1和EBVVCAG Cal2的测 量值自动计算cutoff值。样本的结果分为有反应性， 临界或无反应性，并以COI值（COI=（样本信号值 -0.7×Cal 1信号值）/cutoff值）表示。

Cutoff值的计算公式如下所示： 在cobase 411上，

CO = (Cal1信号值 - 0.7×Cal1信号值) + 0.034 × (Cal2信号值 – 0.7×Cal1信号值)

在cobase 601及cobase 602上，

CO = (Cal1信号值 - 0.7×Cal1信号值) + 0.012 × (Cal2信号值 – 0.7×Cal1信号值)

【阳性判断值】

利用 Elecsys EBV VCA IgG 检测获得的结果可给予 如下解释：

*  包括 VCA 、EA 和 IEA 抗原的 IgG 抗体，但无法 区分。

c）建议将此结果与采用 Elecsys  EBV  IgM  检测和 Elecsys EBV EBNA IgG 检测获得的结果结合起来进 行解释（关于 EBV 感染阶段的确定，请参见下表）。

测定结果高于 cutoff 值的程度与样本中抗体总量无 关。

由于定标曲线不同， 因此 cobas  e  411  分析仪上 Elecsys EBV VCA IgG 检测的 COI 数值不同于其他 cobase 分析仪上获得的数值。然而，这些结果的定 性解释在所有分析仪间都相同，其中 COI 为 1 时的 cutoff 值水平相同。

由于使用的方法不同，不同制造商的测定法得出的 给定样本的 EBVVCA IgG 结果可以不同。

对于 EBV  感染阶段的血清学测定，Elecsys  EBV VCA IgG 检测仅应当与 Elecsys  EBV  IgM 检测和 Elecsys EBV EBNA IgG 检测结合使用。

根据文献中的描述，在使用 Elecsys  EBV 检测方法 时，建议使用以下结果解释表来确定 EBV  感染阶 段。12,18,19

对于标有星号（*）的感染阶段以及上表中未列出的

任何其他结果消息组合，则认为 EBV 感染阶段不确 定。对于这些情况，建议进行额外和/或随访检测。

12

EBV 感染后的个体免疫反应有很大 12  的差异性，而 且不同制造商的检测方法的检测结果可能不同。不 同制造商的检测结果不应互换使用。

阳性判断值的确定：

阳性判断值是通过测定 512 个样本的内部研究确定 的。使用 ROC 曲线分析优化灵敏度和特异性。并通 过外部临床研究对 cut-off 进行验证。

【检验方法的局限性】 限制性-干扰因素

检测以下内源性物质和药物对检测性能的影响。经 检测在所列浓度范围内的干扰物质对结果无影响。

内源性物质

判断标准：对于 COI ≥ 1.0 的样本，偏差≤ 20 %。对 于 COI < 1.0 的样本，偏差≤ 0.2 COI。

无反应性的 EBV VCA IgG 检测结果不能完全排除 EBV 感染的可能性。比如，在急性感染早期，个体 可能尚未产生可检出的 IgG 抗体水平。阴性结果还 可见于感染 EBV 但针对 EBV VCA IgG 检测中包含 的 EBV 抗原未出现 IgG 抗体升高的患者。

检出单个样本中VCA IgG 抗体可表明急性感染或既 往 EBV 暴露。因此，单纯针对 EBV VCA IgG 的检 测结果不足以解释 EBV 感染阶段。

Elecsys EBV VCA IgG 检测是一种定性检测方法。其 数值结果并不表示 EBV 感染的特定阶段，因此不应 与其他制造商的 EBV VCA IgG 检测的数值结果进 行比较。

采用 Elecsys EBV VCA IgG 检测未发现高剂量钩状 效应引起的假阴性结果，但也不能完全排除高剂量 钩状效应的发生。

对于 HIV 患者、接受免疫抑制治疗的患者或患有其 它可导致免疫抑制的疾病的患者，可能适用不同的 血清学特征解释。12,15

药物

体外对 17 种常用药物进行检测。除了伊曲康唑外， 未发现对此检测的显著性干扰。伊曲康唑可导致 COI 值降低。

少数病例中极高浓度的分析物特异性抗体、链霉亲 合素或钌抗体会影响检测结果。通过适当的试验设 计可将影响因素降到最低。

为了明确 EBV  感染阶段，应始终联合进行 3  种 Elecsys 检测，并应当结合患者病史、临床症状和其 他发现对结果加以评估。

cobase 601  和 cobase 602  分析仪：如果 Elecsys EBV VCA/Elecsys EBV IgM 检测方法联合使用,  确 认这些检测输入到系统软件的”特殊清洗“部分,并核 查选择了”步骤 1“(执行清洗)。请参考操作说明书。

【产品性能指标】 特殊性能数据

分析仪的代表性性能指标如下所示。 各个实验室获得的数据可能不同。

精密度

根据 CLSI（临床和实验室标准协会）的方案（EP05 -A3），使用 Elecsys 试剂、样本和质控品测定精密 度：每天 2 次重复检测，共 21 天（n = 84）。获得如 下结果：

d) HS =  人血清

e) PC = PreciControl

分析特异性

使用 Elecsys EBV VCA IgG 和 2 种对比方法（Comp1  和 Comp2）检测了潜在的交叉反应性样本（商品化 检测方法将其鉴定为潜在交叉反应性分析物阳性）。 在内部检测了 110 份样本，另外在外部检测了50 份 样本作为多中心评估研究的一部分。

由于人群中 EBV IgG 抗体的发生率很高，因此大多 数进行交叉反应性检测的样本采用 Elecsys  EBV  VCA IgG 检测得到有反应性结果。使用Elecsys EBV  VCA IgG 得到的反应性结果与至少 1 种竞品检测方 法的检测结果完全一致，下面讨论了一些例外情况。 获得如下结果：

*在 3 种方法中至少 2 种的 1/4 样本（风疹队列）和 1/1 样本 （HSV-1 队列）为 EBV EBNA IgG 有反应，表示既往 EBV 感染阶段。对于竞品 2  的方法，这 2 份样本很可能是 EBV VCA IgG 无应答者。除非另有说明，阳性和阴性一致性是在 个体样本水平上观察，虽然这里仅显示为各个队列的总和。 没有出现临界结果。

没有观察到其他交叉反应性证据，但不能排除潜在 的交叉反应性。

相对特异性和相对灵敏度

评估了一共 1734 份样本的相对灵敏度和特异性（实 验室每日常规要求对 1068 份样本进行 EBV 检测， 其中含有 467 份推测为急性期的样本和 199 份推测 为血清阴性的样本）。所有样本均采用 Elecsys EBV  IgM 检测、Elecsys  EBV VCA  IgG 检测和 Elecsys  EBV EBNA IgG 检测（称为 Elecsys EBV 检测组）， 以及 2 种不同的竞品 EBV 检测组进行检测。EBV  感染阶段是由 Elecsys EBV 检测组（根据“结果解释” 一节中的表），以及根据竞品使用说明由竞品检测组 来确定。样本的 EBV 感染的最终指定阶段是由 3 个 EBV 检测组中至少 2 个一致的 EBV 感染阶段来确 定（多数方法）。如果对于一份样本，3 个 EBV 检 测组中的每个都提出了不同的 EBV 感染阶段，则无 法确定 EBV 感染阶段，该样本从下面所示的性能计 算中排除。

相对灵敏度

在计算中，包括了 1253 份指定阶段为“EBV 感染急 性期”（n = 397）或“既往 EBV 感染”（n = 856）的 样本。结果如下表所示：

相对特异性

在计算中，包括了318份指定阶段为“EBV血清学阴 性”的样本。结果如下表所示：

EBV感染阶段的确定

EBV感染阶段是由Elecsys EBV检测组（根据“结果  解释”一节中的表），以及根据其使用说明由2个竞品 EBV检测组来确定。

使用多数方法，为每个样本指定一个EBV感染阶段。 下表显示了通过Elecsys EBV检测关联多数方法分   类为每个EBV感染阶段的样本数量。

此外，根据多数方法，145份样本分类为某个“不确 定的EBV感染阶段”（假定为早期、过渡期、分离的 VCA IgG或分离的EBNA IgG），并有18份样本不可 能采用多数方法（ 通过3个不同的EBV检测组发现 了3个不同的EBV感染阶段）。

境内临床试验结果

境内临床试验在5家临床试验中心进行，采用试验用 体外诊断试剂与临床参考标准或已上市产品进行比  较研究试验，验证本产品的临床性能。入组样本包  括疑似EB  病毒感染患者的血液样本，共计1621例。 针对EBV感染阶段的确定，试验结果显示，试验体  外诊断试剂与临床参考标准比较的总体临床符合率  为94.3%，对于三个EBV  感染确定阶段的符合率均  达到90%以上。针对EA IgG和VCA IgG  联合检测性 能的验证，试验体外诊断试剂与对比试剂的阳性符  合率为98.7%，阴性符合率为88.3%，总符合率为

94.5%。

【注意事项】

仅用于体外诊断。

在使用本试剂盒时必须遵循所有实验室试剂操作的 注意事项。

所有废弃物必须按照当地法规进行处置。 专业人员可要求获得安全数据报告。

根据欧洲法规（EC）第 1272/2008 号，该试剂盒成 分分级如下：

产品安全性标签依据 EU GHS 指南  联系电话：所有国家：+49-621-7590

所有人源材料应视为具有潜在感染性。所有源于人 血液的产品均由献血者血液单独制备而成，并经检 测显示 HBsAg 及 HCV 和 HIV 抗体阴性。所应用的 检测方法经 FDA 认可或符合欧洲法令 98/79/EC 附 件 II 列表 A。

但由于任何检测方法都不能绝对地排除潜在感染的 风险，故该产品仍需视作患者样本一样处理。如果 出现暴露，就应当按照责任卫生监管机构的指令进 行处理。16,17

避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）形成泡 沫。

产品的生产日期是由每批产品最终包装日期决定， 产品的有效期是由各原料的最短保存时间来决定；

而产品的失效期则是由每批产品生产时的原料已存 在时间来动态决定的，所以生产日期＋有效期不一 定等于失效期。

要了解更多信息，请参见分析仪相关操作手册、相 应使用说明书、产品信息和所有必需物品的说明书 （如果适用于你所在国家）。

此说明书中使用的点（句点/停止点）作为十进制分 隔符，以标记十进制数字的整数部分和小数部分之 间的分隔。未使用千分位分隔符。

【标识的解释】

除了 ISO 15223-1 标准中列出的那些符号和标志外， Roche  Diagnostics 还采用下列符号和标志（对于美 国:  所使用的符号定义参见 dialog.roche.com）：

试剂盒成分

试剂可使用的分析仪/设备 试剂

校准品

复溶或混合后体积 全球贸易项目代码

【参考文献】

1     Odumade OA, Hogquist KA, Balfour HH Jr.  Progress and Problems in Understanding and Managing Primary Epstein-Barr Virus

Infections.Clin Microbiol Rev 2011;24(1):193-209.

2     Luzuriaga K, Sullivan JL.Infectious Mononucleosis.N Engl J Med

2010;362(21):1993-2000.

3     Kerr JR.Epstein-Barr virus (EBV) reactivation and therapeutic inhibitors.J Clin Pathol

2019;72(10):651-658.

4     Okano M, Gross TG.Acute or Chronic

Life-Threatening Diseases Associated With Epstein-Barr Virus Infection.Am J Med Sci 2012;343(6):483-489.

5     Gulley ML, Tang W. Using Epstein-Barr Viral

Load Assays To Diagnose, Monitor, and Prevent   Posttransplant Lymphoproliferative Disorder.Clin Microbiol Rev 2010;23(2):350-366.

6     Dunmire SK, VerghesePS, Balfour HH Jr.

Primary Epstein-Barr virus infection.J Clin Virol 2018;102:84-92.

7     Hurt C, Tammaro D. Diagnostic Evaluation of Mononucleosis-Like Illnesses.Am J Med

2007;120(10):911 e1-8.

8     Green M, Michaels MG.Epstein-Barr Virus

Infection and Posttransplant Lymphoproliferative Disorder.Am J Transplant 2013;13:41-54.

9     Dudley C, Harden P. Renal Association Clinical Practice Guideline on the Assessment of the

Potential Kidney Transplant Recipient.Nephron Clin Pract 2011;118 Suppl 1:c209-224.

10   Nowalk A, Green M. Epstein-Barr Virus.Microbiol Spectr 2016;4(3).

11   European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare (EDQM).Guide to the quality and    safety of organs for transplantation.7th ed:

Council of Europe; 2018.

12   De Paschale M, Clerici P. Serological diagnosis of Epstein-Barr virus infection: Problems and

solutions.World J Virol 2012;1(1):31-43.

13   Rea TD, Ashley RL, Russo JE, et al.A Systematic Study of Epstein- Barr Virus Serologic Assays

Following Acute Infection.Am J Clin Pathol 2002;117(1):156-161.

14   Crowley A, Connell J, Schaffer K, et al.Is There

Diagnostic Value in Detection of Immunoglobulin G Antibodies to the Epstein-Barr Virus Early

Antigen? Biores Open Access 2012;1(6):291-296.

15   Middeldorp JM.Epstein-Barr Virus-Specific

Humoral Immune Responses in Health and

Disease.In: Munz Ch, editor.Epstein Barr Virus Volume 2 One Herpes Virus: Many

Diseases.Springer; 2015;289-324.

16   Occupational Safety and Health Standards: Bloodborne pathogens.(29 CFR Part

1910.1030).Fed.Register.

17   Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of 18 September 2000 on the

protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work.

18   Hess RD.Routine Epstein-Barr Virus Diagnostics from the Laboratory Perspective: Still

Challenging after 35 Years.J Clin Microbiol 2004;42(8):3381-3387.

19   Klutts JS, Ford BA, Perez NR, et

al.Evidence-based Approach for interpretation of Epstein-Barr virus serological patterns.J Clin

Microbiol 2009;47(10):3204-3210

【基本信息】

注册人/生产企业名称：罗氏诊断公司 Roche Diagnostics GmbH

住    所：Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germany

生产地址：Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germany

联系方式：

售后服务单位名称： 联系方式：

代理人名称：罗氏诊断产品(上海)有限公司

住    所：中国(上海)自由贸易试验区希雅路 330 号 7 号厂房第二层 I 部位

联系方式：

【医疗器械注册证编号/产品技术要求编号】

【说明书批准日期/生效日期及修改日期】

【产品名称】

通用名称：EB病毒衣壳抗原IgG抗体检测试剂盒（电 化学发光法）

英文名称：Elecsys EBV VCA IgG

【包装规格】

300测试/盒

【预期用途】

本产品用于体外定性检测人血清和血浆中的 EB 病 毒（EBV）IgG 抗体（包括 VCA  、EA 和 IEA 抗原 的 IgG 抗体，但无法区分）。

本产品用于辅助诊断传染性单核细胞增多症和判定 EBV 感染阶段。

cobase 免疫测定分析仪的工作原理是电化学发光免 疫分析“ECLIA”。

概要

EB 病毒，也称为人疱疹病毒 4（HHV4），是 8 种已 知的人疱疹病毒中的一种，全球约 90 %的人群在年 轻时已经感染，且通常很少引起并发症。这些感染 大多数无症状或仅表现为轻微的非特异性症状。1   最常见的 EBV  相关疾病是症状性的急性原发性感 染，称为传染性单核细胞增多症（IM），主要感染 青少年和年轻成人。IM 的特征是包括发热、咽炎和 颈淋巴结肿大的三联征，通常是以支持疗法为主要 治疗措施的自限性疾病。2 然而，其早期和准确诊断 仍具有临床价值，因为 EBV 具有高度传染性，在极 少数情况下，一些并发症可能造成严重的健康风险。 1 在原发感染期间发生裂解复制后，EBV 终生潜伏， 主要存在于 B-细胞中。3  EBV 感染与多种自身免疫 性疾病以及几种不同的恶性疾病（包括淋巴瘤和癌 症）相关。4 免疫抑制可导致移植后淋巴组织增生性 疾病（PTLD），这是一种致死性的 B 细胞增殖失控 性疾病。5EBV 主要通过唾液传播，但也曾报告性传 播以及通过实体器官和造血干细胞移植的传播。6         各种病毒、细菌和寄生虫病均可引起单核细胞增多 症样症状，尤其是在早期感染期间。7 通常采用生物 标志物联合进行鉴别诊断，以排除其他有类似症状 的感染或状况，例如急性 HIV 或 CMV 感染或弓形 体病。EBV 血清学也可用于测定移植物供体和受体 的免疫状况，评估患者发生 PTLD 的风险，这种风 险可由既往 EBV  初次感染患者的重新激活或新发 EBV 感染引起。8,9,10,11

针对 EBV  的特异性血清学检查通常用于确诊急性 EBV 感染，因为其临床体征和症状的灵敏性或特异 性并非很高。2 通常联合使用 3 种不同的生物标志物 来确定 EBV 感染阶段：EBV 抗原的 IgM 抗体、EBV 病毒衣壳抗原（VCA）的 IgG 抗体和 EBV 核抗原-1 （EBNA-1）的 IgG  抗体。 12,13Anti-EBV  IgM  和 anti-EBV VCA IgG 抗体通常可在疾病临床发作时检 出。IgM 可保持阳性直到原发感染后 2 到 6 个月， 而 VCA IgG 抗体通常终身持续存在。EBNA-1  IgG 抗体通常在原发感染后 6-12 周内出现，且终生持续 存在。因此，存在 IgM  和 VCA  IgG  抗体，缺乏 EBNA-1 IgG 抗体并结合典型的临床表现，表明为急 性感染。而缺乏 IgM  抗体以及存在 VCA  IgG  和 EBNA IgG 抗体这表明既往感染和潜伏状态。12,13 对 于癌症、移植、HIV/AIDS  和自身免疫综合症中的 EBV 监测，则适用一些特定规则，具体情况因疾病 而异。12,14,15

【检验原理】

夹心法原理。总检测时间：18 分钟。

(cobas 8000 e 801, cobaspro e 801,cobas e 402)

l 第 1 次孵育：21μL 样本、生物素化的 EBV-特 异性重组抗原(33μL)、钌复合物 a)标记的 EBV- 特异性重组抗原（36μL）形成夹心复合物。

l 第 2  次孵育： 加入包被链霉亲合素的微粒 （30μL）后，该复合物通过生物素与链霉亲合 素的相互作用与固相结合。

l 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将微粒 吸附在电极表面。未与微粒结合的物质通过 ProCellII M 除去。给电极加以一定的电压，使 复合物化学发光，并通过光电倍增器测量发光 强度。

l 仪器通过软件（比较由样本反应产物获得的电 化学发光信号值和先前定标获得的 cutoff 值） 自动计算检测结果。

a) Tris(2,2’-双吡啶)钌(II)-复合体 (Ru(bpy)  )

【主要组成成分】 试剂-工作溶液

cobase pack（M ，R1，R2）标记为 EBVVCAG。

M    包被链霉亲合素的微粒，1 瓶，16 mL：包被链 霉亲合素的微粒 0.72 mg/mL；防腐剂。

R1   生物素化的 EBV-抗原，1 瓶，14.8mL：生物素 化的 EBV-特异性抗原（重组体，大肠杆菌）> 1000  μg/L，MES b)缓冲液，50 mmol/L，pH 6.5 ；防腐剂。

R2   钌标记的 EBV-抗原，1 瓶，15.8 mL：钌复合物 标记的 EBV-特异性抗原（重组体，大肠杆菌）> 1000 µg/L，MES 缓冲液，50 mmol/L，pH 6.5；防腐剂。

b) MES =  吗啉乙烷磺酸

EBVVCAG Cal1       阴性定标液 1（冻干品），1 瓶，

每瓶 1.0  mL：人血清，对 EBV VCA IgG 无反应；缓冲液；防腐 剂。

EBVVCAG Cal2       阳性定标液 2（冻干品），1 瓶，

每瓶 1.0 mL：人血清，对 EBV VCA IgG 有反应；缓冲液；防腐 剂。

提供的物品

参阅“试剂-工作溶液”一节。

      2 ×4 试剂瓶用标签

      2 个贴有标签的压盖式小空瓶

需要的物品（未提供）

●         REF 08355428190，PreciControl EBV

IgM/VCA IgG，注册证号：国械注进20243400376， 6 ×2.0 mL   

●         REF 11776576322 ，CalSet Vials ，2 × 56只压 盖式小空瓶

●         通用实验室设备

●         cobase 分析仪

●         蒸馏水或去离子水

cobase 402  和 cobase 801 分析仪所需附加材料：

●         REF 06908799190，三丙胺缓冲液ProCell II M ，国械备20171106号，2 ×2 L系统溶液

●         REF 04880293190，缓冲液CleanCell M，国 械备20150053 ，2 ×2 L测量池清洗液

●        REF 07485409001，储液杯Reservoir Cup，8 个，用于供应三丙胺缓冲液ProCellII M和缓冲 液CleanCell M

●         REF 06908853190，清洗液PreClean II M，国 械备20171159号，2 ×2 L  洗液

●         REF 05694302001，分析吸头/分析杯托盘，6 盘 × 6  叠 × 105个分析吸头和105个分析杯，3  个废物盒

●         REF 07485425001，清洁杯Liquid Flow

Cleaning Cup，2个，用于检测单元LFC保养时供 应清洗液 ISE Cleaning Solution/Elecsys

SysClean

●         REF 07485433001，预清洗清洁杯PreWash    Liquid Flow Cleaning Cup ，1个，用于预清洗单 元LFC保养时供应清洗液ISE Cleaning Solution   /Elecsys SysClean

●         REF 11298500316，清洗液ISE Cleaning

Solution/Elecsys SysClean，国械备20151638号， 5 × 100 mL系统清洗液

【储存条件及有效期】

2～8℃保存，有效期 12 个月。  生产日期和失效日期：见标签。

避免冷冻。

请垂直摆放 cobase pack，以确保使用前自动混合过 程中微粒充分混匀。